کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا  High Performance Liquid Chromatography

كروماتوگرافي تكنيكي است براي جداسازي تركيبات يك مخلوط شيميايي جهت شناسايي يا اندازه گيري مقادير كمي تركيبات آن.
 
اساس کروماتوگرافی
 
جذب سطحی مواد و توزیع آن‌ها در دو فاز ساکن و متحرک است.

انواع   کروماتوگرافي را براساس نوع فاز متحرک نام گذاري مي کنند.
 
انواع کروماتوگرافی براساس نوع فاز متحرک 
 
- کروماتوگرافی مایع
- کروماتوگرافی گازی

بر حسب ماهیت فاز متحرک و ماهیت فاز ساکن کروماتوگرافی به چهار بخش اصلی طبقه بندی می‌شود.۱- کروماتوگرافی مایع – جامد (LSC)

۲- کروماتوگرافی گاز – جامد  (GSC)

۳- کروماتوگرافی مایع – مایع ( LLC)

۴- کروماتوگرافی گاز- مایع (GLC)

روش کار در HPLC

- از فشارهای خیلی بالا برای برقراری جریان فازمتحرک استفاده می شود.
- فشار لازم برای جریان فاز متحرک، توسط یک پمپ رفت وبرگشتی مخصوص تولید می شود .
- مخلوطی که باید جداسازی شود توسط حلال یا مخلوطی از حلال ها (شوینده/ فاز متحرک) به ستون منتقل می شود.
- ستون لوله ای است از جنس فولاد ضد زنگ که با فاز ساکن پر شده است. جداسازی در درون ستون انجام می شود.
- اجزایی که باید جداسازی شوند، با سرعت های متفاوت از فاز ساکن عبور کرده و ستون را در زمان های مختلف ترک می کنند.
- جزئی از مخلوط که جذب سطحی ضعیفی بر روی فاز ساکن دارد سریع تر از گونه ی باشدت جذب بیش تر، از ستون خارج می شود.
- پیک های گونه های خروجی از ستون به کمک یک آشکار ساز مشخص می شود.
- این اطلاعات به واحد ارزیابی داده ها منتقل و خروجی که یک کروماتوگرام است رسم می شود.
- تعداد پیک ها معادل تعداد اجزای جداسازی شده در نمونه است و سطح زیر پیک ها معادل مقدار آن اجزا است.

مزایا و محدودیت های این روش

- برتری اصلی HPLC  شامل قدرت تفکیک بالا، سرعت، حساسیت، خودکارسازی وکاربردگسترده ی آن می باشد.
- محدودیت اصلی آن نیز شامل قیمت بالای دستگاه و تجربه لازم در کسب نتایج دلخواه می باشد.
تهیه کننده: مهندس فرنوش فتاحی